www.carnewsm.com-汤芳人体艺术,国产后入清纯学生妹,握住校花两团雪乳高H,吃奶呻吟打开双腿做受动态图

咨詢(xún)熱線(xiàn)

13517991832

當前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  液相色譜使用者必須謹記的秘訣

液相色譜使用者必須謹記的秘訣

更新時(shí)間:2022-09-22      點(diǎn)擊次數:1008

液相色譜對于多數人來(lái)說(shuō)都是很好上手的儀器了,但是就算是用過(guò)幾年、經(jīng)驗豐富的分析員都會(huì )習慣于一些錯誤的操作(師傅教錯了?),經(jīng)常導致一些儀器故障。方便快捷的分析過(guò)程固然重要,但是為了多做樣品而忽略了一些步驟,往往得不償失,哪些操作不能做?哪些懶兒不能偷?那些小概率的故障師傅沒(méi)教怎么辦?液相使用過(guò)程中有哪四大關(guān)鍵因素要注意?本文一一告訴你哦!


流動(dòng)相不過(guò)濾


因為塵?;蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì )磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應預先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相最好在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過(guò),可采用Millipore濾膜(0.2μm或0.45μm)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經(jīng)常清洗或更換。


使用后沒(méi)有及時(shí)清洗泵


流動(dòng)相不應含有任何腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動(dòng)相不應保留在泵內,尤其是在停泵過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間的情況下。如果將含緩沖液的流動(dòng)相留在泵內,由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。


流動(dòng)相走空


泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶?jì)鹊牧鲃?dòng)相被用完,否則空泵運轉也會(huì )磨損柱塞、缸體或密封環(huán),最終產(chǎn)生漏液。

沒(méi)有流動(dòng)相流出,又無(wú)壓力指示怎么辦?可能是泵內有大量氣體,這時(shí)可打開(kāi)泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉,將氣泡排盡,也可用一個(gè)50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個(gè)可能原因是密封環(huán)磨損,需更換。


壓力和流量不穩了?


原因可能是氣泡,需要排除;或者是單向閥內有異物,可卸下單向閥,浸入丙酮內超聲清洗。有時(shí)可能是砂濾棒內有氣泡,或被鹽的微細晶?;蜃躺奈⑸锊糠侄氯?,這時(shí),可卸下砂濾棒浸入流動(dòng)相內超聲除氣泡,或將砂濾棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)內迅速除去微生物,或將鹽溶解,再立即清洗。

壓力為啥過(guò)高或過(guò)低?可能是是管路被堵塞,需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏。檢查堵塞或泄漏時(shí)應逐段進(jìn)行。


在進(jìn)行梯度洗脫時(shí),由于多種溶劑混合,而且組成不斷變化,因此帶來(lái)一些特殊問(wèn)題,必須充分重視:


PS:(在液相色譜中對組分復雜的樣品采用梯度洗脫的方法。在同一個(gè)分析周期中,按一定程序不斷改變流動(dòng)相的濃度配比,稱(chēng)為梯度洗脫。從而可以使一個(gè)復雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。


梯度洗脫的優(yōu)點(diǎn):1.縮短分析周期;2.提高分離能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加靈敏度。但有時(shí)引起基線(xiàn)漂移。)


梯度洗脫的流動(dòng)相選擇不當


要注意溶劑的互溶性,不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動(dòng)相。有些溶劑在一定比例內混溶,超出范圍后就不互溶,使用時(shí)更要引起注意。當有機溶劑和緩沖液混合時(shí),還可能析出鹽的晶體,尤其使用磷酸鹽時(shí)需特別小心。


忽略的空白梯度洗脫


梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,以保證良好的重現性。進(jìn)行樣品分析前必須進(jìn)行空白梯度洗脫,以辨認溶劑雜質(zhì)峰,因為弱溶劑中的雜質(zhì)富集在色譜柱頭后會(huì )被強溶劑洗脫下來(lái)。用于梯度洗脫的溶劑需*脫氣,以防止混合時(shí)產(chǎn)生氣泡。


忽略了溶劑混合所帶來(lái)的粘度變化


混合溶劑的粘度常隨組成而變化,因而在梯度洗脫時(shí)常出現壓力的變化。例如甲醇和水粘度都較小,當二者以相近比例混合時(shí)粘度增大很多,此時(shí)的柱壓大約是甲醇或水為流動(dòng)相時(shí)的兩倍。因此要注意防止梯度洗脫過(guò)程中壓力超過(guò)輸液泵或色譜柱能承受的最大壓力。


關(guān)于六通閥的正確使用和維護


①樣品溶液進(jìn)樣前必須用0.45μm濾膜過(guò)濾,以減少微粒對進(jìn)樣閥的磨損。


②轉動(dòng)閥芯時(shí)不能太慢,更不能停留在中間位置,否則流動(dòng)相受阻,使泵內壓力劇增,甚至超過(guò)泵的最大壓力;再轉到進(jìn)樣位時(shí),過(guò)高的壓力將使柱頭損壞。


③為防止緩沖鹽和樣品殘留在進(jìn)樣閥中,每次分析結束后應沖洗進(jìn)樣閥。通??捎盟疀_洗,或先用能溶解樣品的溶劑沖洗,再用水沖洗。


關(guān)于色譜柱的使用和維護


色譜柱的正確使用和維護十分重要,稍有不慎就會(huì )降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過(guò)程中,需要注意下列問(wèn)題,以維護色譜柱。


調節流速太快。。。

避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料,因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉動(dòng)不能過(guò)緩(如前所述)。


反沖色譜柱。。。

一般說(shuō)來(lái)色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì )迅速降低柱效。

預柱和保護柱。。。

選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預先被硅膠“飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。


避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。


【來(lái)自前輩的經(jīng)驗】小概率故障如何排除?


【1】泵壓跳動(dòng),跳動(dòng)范圍10bar左右。。。


解決方法:

1、原先小白頭有點(diǎn)臟,更換后尚未解決;

2、將主動(dòng)閥上的閥芯取出后,發(fā)現有類(lèi)似氣泡存在,浸入甲醇-水溶液超聲5min,以試著(zhù)去除氣泡,重新將其安裝后再觀(guān)察,仍未解決;

3、更換新的閥芯,將其安裝后,不再有跳動(dòng),觀(guān)察一段時(shí)間后比較平穩,成功解決。

【2】發(fā)生故障:①plug homing over pressure

② 灌注及設流速時(shí)均無(wú)壓力也不見(jiàn)液體流出

③檢測器光閘不能復位④進(jìn)完大濃度樣品后,進(jìn)空白相應位置也出峰。。。


可能原因:①在線(xiàn)過(guò)濾器堵了

②泵頭下單向閥堵了

③有可能是檢測池臟了,也有可能是光路有點(diǎn)堵,再不行可能是燈壽命到了

④小抹布臟了,需要換

解決方法:

①在線(xiàn)過(guò)濾器卸下來(lái),置燒杯,加純化水煮沸5-10分鐘后甲醇超一下一般就可以了,如果還堵的話(huà)就拿稀硝酸泡,還不行的話(huà)就換新的了,這本身是個(gè)消耗品


②把泵頭下單向閥卸下來(lái),兩個(gè)都有可能堵,剛卸下來(lái)時(shí)豎著(zhù)在耳邊搖一搖是聽(tīng)不到聲音的。簡(jiǎn)單的拿洗耳球把單向閥吹吹就行了(注意方向),吹了沒(méi)反應可以拿溶劑超聲,但不可水煮,一般超至在耳邊搖能聽(tīng)見(jiàn)聲音就不影響實(shí)驗


③先用溶劑把檢測池沖沖,用啥試具體樣品而定;若沖了還不行,把檢測池卸下,看燈能量,若能量還可以(有個(gè)幾千),可能得清洗光路了。第一次清洗的話(huà)建議還是叫工程師來(lái),因為待清理的部件在檢測器的最下方,有一個(gè)黑色片片,中間有一條縫,而且那一塊的螺絲都是八角的,卸起來(lái)很麻煩。


④把5個(gè)樣品盤(pán)都拿出來(lái),可以看見(jiàn)里面有一個(gè)黑色突起(看不清用手電筒),平時(shí)進(jìn)樣針就是從那個(gè)地方吸樣的。手伸進(jìn)去就可以卸下來(lái),里面有一個(gè)小白圈圈(用多了自然就黑了),換一個(gè)新的就行了,買(mǎi)儀器時(shí)一般配有10個(gè)。



液相色譜在使用過(guò)程中的四大關(guān)鍵因素



1、液相色譜儀本身:

對于儀器本身一般不會(huì )有問(wèn)題,特別是剛買(mǎi)回來(lái)的新儀器。對于儀器本身最重要的就是儀器的校驗,剛買(mǎi)回來(lái)的儀器一般都是由賣(mài)家先對儀器做系統的確認工作(包括IQ、PQ、OQ),確認順利通過(guò)后,再請國家或省級儀器檢定局的來(lái)校驗,檢定合格后就可以放心使用了,除此之外,一些做得好的公司每半年會(huì )對儀器進(jìn)行一次的內部校驗,目的就是為了保證儀器的正??蛇\行狀態(tài)。

2、色譜條件:

色譜條件一般包括流動(dòng)相、色譜柱、檢測波長(cháng)、流速及進(jìn)樣量。流動(dòng)相就涉及到配制流動(dòng)相所用到的水和試劑試液,水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18.2兆歐級別,試劑試液要求用色譜級別的,原因為防止水和試劑試液中的雜質(zhì)對色譜結果的干擾。色譜柱會(huì )因不同的品種而有不同的要求,但每根色譜柱都有它的清洗要求,這個(gè)在色譜柱說(shuō)明書(shū)上都可以找到,一定要根據上面的要求進(jìn)行,否則會(huì )造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短,檢測波長(cháng)也會(huì )因品種的不同有不同的要求,這里需要指出的是要注意觀(guān)察檢測器氘燈能量的變化,比如基線(xiàn)波動(dòng)大,活性成分的響應值突然變小等,都有可能是氘燈的能量不足所引起的,氘燈一般建議使用800小時(shí),但實(shí)際上使用時(shí)間不止,可根據實(shí)際情況更換。流速也因品種的不同而不同,一般為1.0ml/min,流速是不可隨意改動(dòng)的,特別是作為QC人員,但是作為研發(fā)人員,有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗證,會(huì )對流速進(jìn)行改變以評價(jià)方法的適用性。對于進(jìn)樣量因不同的品種也有不同規定,進(jìn)樣量這塊現在都使用自動(dòng)進(jìn)樣,所以進(jìn)樣精密度都很好,不需強調什么。

3、操作人員:

首先,作為液相操作人員,一定要認真學(xué)習夜想的說(shuō)明書(shū),掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常的維護保養,掌握最基礎故障的排除和維修。一般液相的操作規程也是有操作人員起草的,所以只要嚴格按照操作要求進(jìn)行操作,一般不會(huì )出現問(wèn)題,當然啫喱需要特別指出的是對于液相的日常維護保養很重要,比如流動(dòng)相的過(guò)濾、脫氣、泵密封墊的清洗、系統管路的清洗、溶劑過(guò)濾頭的清洗等,倘若不堅持,很容易導致色譜柱堵塞、系統壓力過(guò)大、色譜峰異常等不必要的故障,浪費時(shí)間。其次,操作人員在配制液相分析用樣品溶液時(shí),最好由同一個(gè)人單獨完成,以免不必要的偶然誤差。

4、液相安裝環(huán)境:

液相色譜儀應盡量安裝于水平、遠離振動(dòng)、電磁干擾的屋內的臺面上,有條件的話(huà)盡量將液相數據處理系統分隔開(kāi),一個(gè)是防止色譜基線(xiàn)噪音偏大,基線(xiàn)不穩等,一個(gè)是為減少對人體的危害。


聯(lián)系我們

杭州天釗科技有限公司 公司地址:杭州市西湖區金蓬街321號2幢C座511室   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)
  • 聯(lián)系人:劉經(jīng)理
  • QQ:35102228
  • 公司傳真:0571-88866373
  • 郵箱:sales1@wookhplc.com

掃一掃 更多精彩

網(wǎng)站二維碼

微信二維碼

天峻县| 合川市| 东阿县| 梧州市| 屯留县| 宿松县| 洪江市| 浮山县| 平凉市| 惠东县| 霞浦县| 马龙县| 大城县| 黔江区| 安多县| 高碑店市| 舞阳县| 龙陵县| 贵阳市| 新龙县| 哈密市| 游戏| 车致| 五指山市| 堆龙德庆县| 子洲县| 深水埗区| 资中县| 康平县| 嘉黎县| 清新县| 元氏县| 湖南省| 盐边县| 阿勒泰市| 五原县| 高邮市| 中超| 襄垣县| 渭源县| 郧西县|